مشخصات مقاله:
عنوان فارسی مقاله:
یک سیستم تشخیص مبتنی بر ریزآرایه برای مواد غذایی اصلاح شده ژنتیکی (GM)
عنوان انگلیسی مقاله:
A microarray-based detection system for genetically modified (GM) food ingredients
کلمات کلیدی مقاله:
گروه ژنتیک مولکولی، اسپانیا
مناسب برای رشته های دانشگاهی زیر:
زیست شناسی، پزشکی و بیوتکنولوژی
مناسب برای گرایش های دانشگاهی زیر:
علوم سلولی و مولکولی، میکروبیولوژی، ژنتیک و ژنتیک پزشکی
وضعیت مقاله انگلیسی و ترجمه:
مقاله انگلیسی را میتوانید به صورت رایگان با فرمت PDF از باکس زیر دانلود نمایید. ترجمه این مقاله با فرمت WORD – DOC آماده خریداری و دانلود آنی میباشد.
فهرست مطالب:
چکیده
اختصارات
مقدمه
مواد و روش ها
ماده نمونه
گیاهان
خالص سازی DNA
PCR و برچسب زنی
طراحی ریزآرایه با چگالی کم
هیبریداسیون آرایه DNA و تشخیص رنگ سنجی
نتایج
تکثیر توافقی
اختصاصی بودن روش
حساسیت روش برای یک آزمون GMO انفرادی
حساسیت روش در یک مخلوط GMO حاوی Btl 1, CBH351, RRS و GA21
حساسیت روش در یک مخلوط GMO حاوی MON810, T25, T45 و Topasl9/2
بحث
قسمتی از مقاله انگلیسی و ترجمه آن:
Abstract
A multiplex DNA microarray chip was developed for simultaneous identification of nine genetically modified organisms (GMOs), five plant species and three GMO screening elements, i.e. the 35S promoter, the nos terminator and the nptII gene. The chips also include several controls, such as that for the possible presence of CaMV. The on-chip detection was performed directly with PCR amplified products. Particular emphasis was placed on the reduction of the number of PCR reactions required and on the number of primers present per amplification tube. The targets were biotin labelled and the arrays were detected using a colorimetric methodology. Specificity was provided by specific capture probes designed for each GMO and for the common screening elements. The sensitivity of the assay was tested by experiments carried out in five different laboratories. The limit of detection was lower than 0.3% GMO for all tests and in general around 0.1% for most GMOs. The chip detection system complies with the requirements of current EU regulations and other countries where thresholds are established for the labelling of GMO.
چکیده
یک تراشه میکروآرایه ی مولتی پلکس DNA برای شناسایی همزمان 9 ارگانیسم اصلاح شده ژنتیکی ( GMOs)، پنج گونه گیاهی و سه عنصر غربالگری GMO، یعنی پروموتر 35S، خاتمه دهنده nos و ژن nptll توسعه داده شد. تراشه ها همچنین شامل چندین شاهد، مانند شاهد برای حضور احتمالی پروموتر CaMV هستند. تشخیص بر روی تراشه، به طور مستقیم با محصولات تکثیر شده ی PCR انجام شد. تاکید خاص بر کاهش تعداد واکنش-های PCR مورد نیاز و تعداد آغازگرهای حاضر در هر لوله تکثیری بود. هدف نشان دار شدن با بیوتین بود و آرایه ها با استفاده از یک روش رنگ سنجی تشخیص داده شدند. اختصاصی بودن توسط پروب های اختصاصی ضبط طراحی شده برای هر GMO و برای عناصر مشترک غربالگری فراهم شد. حساسیت روش از طریق آزمایش های انجام شده در 5 ازمایشگاه مختلف مورد بررسی قرار گرفت. حد تشخیص برای همه آزمایش ها، کمتر از 3/0 % GMO و به طور کلی در حدود 1% برای بیشتر GMO ها بود. سیستم تشخیص تراشه با مقررات رایج اتحادیه اروپا و سایر کشورها مطابق بود که در آن آستانه هایی برای برچسب زدن GMO گسترش یافته است.